1. Al determinar la endotoxina en la sangre, preste atención a la selección de métodos y reactivos.

2. Preparación de plasma o suero

Como muestra clínica común, el plasma es la muestra principal y su tasa de utilización es superior al 95%. Por lo tanto, es muy importante preparar plasma como parte principal del fluido corporal. Según Das, la endotoxina generalmente se une a las plaquetas además de su estado libre, por lo que es más apropiado usar plasma que contenga una gran cantidad de plaquetas como muestra. Al preparar plasma humano o plasma animal, en la actualidad, para evitar el daño celular, los países extranjeros utilizan principalmente la separación a baja temperatura, utilizando muestras de plasma que contienen una gran cantidad de plaquetas, es decir, en condiciones de separación de 4 ℃ 1000gx10 minutos, o 3000gx40 Condiciones de separación de segundos cuando no hay centrífuga de baja temperatura. No está permitido realizar separaciones a alta velocidad y a largo plazo a temperaturas normales. Además, al separar plasma o suero, debe evitarse la contaminación bacteriana.

Preparación del suero: use una jeringa sin anticoagulante para recolectar sangre y transfiérala a un tubo de centrífuga, y colóquela en un baño de agua con hielo durante 30 minutos, a 4 ℃, 1000xg, 10 minutos para centrifugar.

Después de la separación del plasma o suero, si no se usa temporalmente, puede congelarse a -80 ℃ y usarse dentro de 1 mes. Nota Para evitar la adsorción de endotoxinas, utilice un tubo de ensayo de vidrio para el almacenamiento.

3. Tipos y efectos de los anticoagulantes

Durante la preparación del plasma, debido a la adición de ciertos anticoagulantes, el tipo y la cantidad de anticoagulantes tienen un gran impacto en la tasa de recuperación. Generalmente, los anticoagulantes de uso común incluyen principalmente heparina, citrato de sodio y EDTA, entre los cuales la heparina es la más utilizada. Sin embargo, sabemos que una gran cantidad de heparina interferirá con la reacción de la endotoxina, especialmente para el método de calentamiento por dilución y el método de extracción con cloroformo, lo que reducirá la tasa de recuperación, pero tendrá menos impacto en el método PCA, por lo que la cantidad de heparina agregada y liberado durante la preparación de plasma solo necesita 2~5 μ L/ml es suficiente.