La cadena de polisacárido del antígeno O se conecta con la región central del lípido A en la superficie periplásmica de la membrana celular para formar una molécula de lipopolisacárido completa. La transferencia de moléculas de lipopolisacárido desde el espacio periplásmico a la membrana externa, pero el mecanismo de su presentación en la membrana externa aún no está claro. Se especula que puede lograrse a través del "puente de Bayer" en los sitios de unión de las membranas interna y externa.

Waal (Rfal) es la única enzima que se sabe que está relacionada con la reacción del enlazador. Waal puede conectar eficazmente polímeros de peso molecular relativo grande u oligómeros de peso molecular relativo pequeño a la región central del lípido A. La característica básica de la reacción de unión es que es conservadora y no depende de la vía de síntesis del antígeno O. El antígeno O sintetizado por diferentes bacterias a través de diferentes formas se puede conectar y expresar de manera efectiva en la superficie celular, que también es la base para la investigación y expresión del antígeno O heterólogo de la cepa de ingeniería genética Escherichia coli K-12.

La estructura primaria de Escherichia coli K-12 y Salmonella typhimurium Waal no tiene una similitud obvia. Aunque ambos contienen múltiples dominios transmembrana, sus perfiles hidrofóbicos son obviamente similares, pero sus funciones no pueden ser complementarias. La actividad eficaz de cada enzima Waal puede requerir la coordinación de Waak (es decir, Rfak), lo que indica que la modificación específica de la estructura central o (y) la interacción específica entre Waal y la proteína Waak pueden ser necesarias para la actividad de cada enzima Waal. En la superficie celular, el antígeno O puede existir solo en forma de unión con el núcleo del lípido A (como Salmonella typhimurium), o en forma de unión con o sin el núcleo del lípido A. Este último está representado por el antígeno O de Vibrio cholerae O139. Solo hay un oligosacárido corto (unidad repetitiva única) conectado con el núcleo, y el polisacárido capsular con un peso molecular relativo grande (no conectado con el núcleo) contiene la misma estructura de unidad repetitiva.