1. Agregar muestras: Agregar la dilución de la muestra a la placa recubierta, diluir el suero en PBS o solución salina a 1:20 y luego agregar 10 ul a los pocillos de reacción de la microplaca.

2. Adición de control: control negativo de 3 pocillos, control positivo de 1 pocillo y suero de control de 100 ul.

3. Incubación: Agite la placa de reacción para mezclar bien la muestra y luego colóquela en una incubadora a 37 °C o al baño maría durante 20 minutos.

4. Lavado de pisos: Diluir 15 ml de solución de lavado a 300 ml con agua destilada. Al lavar a mano, el contenido del aire de la placa de reacción debe verterse y colocarse en el orificio lleno de líquido de lavado, y luego reposar 30 para agitar violentamente. Repetir esta operación 5 veces y batir hasta secar. La máquina debe funcionar 5 veces. Se pueden inyectar 200 ul de solución de lavado en cada pocillo o llenarlos, luego dejarlos durante 30 minutos y secarlos.

5. Agregue solución de trabajo marcada con enzima: agregue 100 ul de solución de trabajo marcada con enzima a cada pozo en una incubadora a 37 ° C y lave la placa cinco veces después de 20 minutos. La placa de lavado es la misma que en el paso 4.

6. Este es el último paso de la reacción, con desarrollo de color y terminación de la reacción: se agregan 50 ul del sustrato al pocillo de reacción y se desarrolla el color durante 10 minutos en la oscuridad a 37 °C. Se detiene la solución en cada pocillo y mezclar para terminar la reacción. El uso de las microplacas se realizará en condiciones estériles. Desinfecte y limpie cuidadosamente las placas después de su uso, pero tenga en cuenta que algunas placas deben leer las instrucciones detenidamente para ver si se pueden esterilizar a altas temperaturas.